ANTISTREPTOLYSIN O: KVANTIFIKACE, ODŮVODNĚNÍ, TECHNIKA, PATOLOGIE - BIOLOGIE - 2025

O ASO je protilátka tvořená v reakci na infekce způsobené Streptococcus pyogenes, také známý jako Streptococcus beta-hemolytické A. Tato skupina vytváří dva exotoxiny s hemolytickou aktivitu hovory streptolysins „S“ a „O“.

Streptolysin S je zodpovědný za beta hemolýzu, ke které dochází v krevním agaru, a přestože je toxický pro určité buňky imunitního systému, není antigenní. Zatímco streptolysin O, který je labilní vůči kyslíku, je zodpovědný za hemolýzu, ke které dochází pod krevním agarem, a to je antigenní.

Streptococcus pyogenes / Schéma toho, co se děje v testu ASTO (aglutinační reakce). (Protilátky vázané na latexové částice, které obsahují specifický antigen). Zdroj: Uživatel: Graham Beards / Alejandro Porto

Proto, když buňky imunitního systému interagují se streptolysinem O, vzniká specifická imunitní odpověď, která generuje aktivaci B lymfocytů. Tyto buňky produkují protilátky namířené proti streptolysinu O. Proto se protilátky nazývají antistreptolysin O.

Streptococcus pyogenes způsobuje různé patologie, mezi něž patří: angína, erysipelas, impetigo, šestinedělí, šarlatová horečka a septikémie. Anti-streptolysin O protilátky se objevují 8 až 30 dní po začátku infekce.

Většina těchto infekcí je v populaci velmi běžná, takže je běžné, že lidé mají v krvi antistreptolysinové O protilátky. Nízké titry ukazují na dřívější infekci touto bakterií, ale vysoký nebo rostoucí titr označuje nedávnou nebo probíhající infekci.

Kvantifikace antistreptolysinových O protilátek

V laboratoři lze titr protilátky proti streptolysinu "O" měřit sérologickým testem. Antistreptolysinový O (ASTO) test je založen na aglutinační reakci s latexem.

Může to být provedeno semikvantitativně, hlášení křížením nebo lze také kvantifikovat titr. Nalezení hodnot až do 200 IU / ml nebo Todd jednotek / ml je normální a není významné. Nad touto hodnotou je považován za pozitivní a klinicky významný.

Tento test nevyžaduje, aby se pacient postil. Sérum se používá jako vzorek, to znamená, že krev pacienta je odebrána a umístěna do zkumavky bez antikoagulantu a poté odstředěna, aby se získalo sérum.

Základy techniky ASTO

Tato technika používá latexové částice jako podporu pro fixaci antigenu streptolysinu O. Absorbované částice antigenu reagují se sérem pacienta. Pokud má pacient antistreptolysin O protilátku, bude se vázat na antigen připojený k latexové částici.

Tato vazba způsobuje aglutinaci, která je makroskopicky viditelná. Intenzita reakce je přímo úměrná koncentraci přítomných protilátek.

Techniky

- Semikvantitativní technika

Intenzita reakce může být semikvantifikována křížením. Za tímto účelem se odebere a umístí sérologická reakční destička:

50 ul séra a 50 ul činidla ASTO. Dobře promíchejte s dřevěným párátkem a vložte do automatického mixéru na 2 minuty. Pozorovat. Pokud automatický rotátor není k dispozici, musí být proveden ručně.

Výklad

Zavěšení bez hrudek (jednotné): negativní

1. + = slabá reakce

2. ++ = mírná reakce

3. +++ = mírná reakce

4. ++++ = silná reakce

Séra, která jsou pozitivní se 3 a 4 kříži, lze kvantifikovat.

- Kvantitativní technika

Pro kvantifikaci titru se provede sériová ředění 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Postupujte takto: odeberou se 4 zkumavky nebo Kahnovy zkumavky a na všechny se přidá 0,5 ml fyziologického roztoku. Poté se do první zkumavky přidá 0,5 ml séra pacienta. Míchá se dobře. Tato zkumavka odpovídá ředění 1: 2.

Následně se 0,5 ml převede do zkumavky 2 a dobře se promíchá. Tato zkumavka odpovídá zředění 1: 4 atd., Dokud není dosaženo požadovaného zředění.

Vezměte 50 µl každého ředění a reagujte s 50 µl činidla ASTO na aglutinační destičce, jak je vysvětleno v semikvantitativní technice.

Výklad

Zohlední se nejvyšší ředění, při kterém je pozorována viditelná aglutinace. Výpočty se provádějí takto:

ASTO = Inverze nejvyššího pozitivního ředění x citlivost techniky (konstanta).

Příklad: Pacient s pozitivní reakcí do 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml nebo Todd jednotky / ml.

Referenční hodnota

Normální dospělý: až 200 IU / ml

Normální děti: až 400 IU / ml

doporučení

Doporučuje se namontovat pozitivní a negativní kontrolu s pacienty, aby se zajistilo, že je činidlo v optimálním stavu. Pokud pozitivní kontrola aglutinuje nebo negativní kontrola aglutinuje, nelze činidlo použít.

Reakce musí být interpretována po 2 minutách, po této době není platná, pokud dojde k aglutinaci. To jsou falešně pozitivní.

Hyperlipemická séra narušují reakci. Mohou dát falešné pozitivy.

Izolovaná hodnota ASTO není příliš užitečná. Musí být doprovázeny příznaky.

Kromě toho je vhodné provést alespoň 2 měření ASTO v případě podezření na reumatickou horečku nebo post-streptokokovou glomerulonefritidu, aby se prokázalo zvýšení hladin antistreptolysinu O a potvrdila se tak diagnóza.

Patologie s vysokými titry antistreptolysinu O

Anti-streptolysinové protilátky jsou zvýšeny poté, co trpí infekcí Streptococcus pyogenes nebo ß-hemolytickou infekcí Streptococcus skupiny A.

Mezi ně patří: akutní faryngitida, šarlatová horečka, impetigo, erysipel, puerperální horečka a septikémie.

U některých pacientů, kteří trpěli nedávnými nebo opakujícími se streptokokovými infekcemi, se mohou vyvinout autoimunitní onemocnění jako následek nebo komplikace post-streptokokové infekce, jako je akutní glomerulonefritida a revmatická horečka.

Post streptokokové autoimunitní choroby

Revmatická horečka

Jedná se o zánětlivou komplikaci nebo následky, které se mohou objevit 1 až 5 týdnů po streptokokové infekci. Titry antistreptolysinu O se významně zvyšují 4 až 5 týdnů po nástupu onemocnění.

Vysoký titr ASTO řídí diagnózu, ale nesouvisí s vážností onemocnění a jeho snížení neznamená zlepšení.

Protilátky antistreptolysinu O zkříženě reagují proti kolagenu a svalovým vláknům a ovlivňují určité orgány (mimo jiné srdce, kůži, klouby a nervový systém).

Tato komplikace nebo následek se vyskytuje se srdečním postižením, horečkou, malátností, nesurpativní migrační polyartritidou, chorea atd.

Akutní glomerulonefritida

Akutní glomerulonefritida je nesupurativní následek, ke kterému dochází v důsledku ukládání komplexů antigen-protilátka na glomerulární bazální membráně.

Tvorba a cirkulace komplexů antigen-protilátka (ag-ac) generovaných streptokokovými infekcemi může vést k exsudativním změnám a zánětům glomerulů, s proteinurií a hematurií.

Tyto ag-ac komplexy jsou uloženy v glomerulu a aktivují komplementovou kaskádu, což vede k poškození glomerulárního endotelu. Z tohoto důvodu se považuje za autoimunitní onemocnění, protože imunitní systém jedince poškozuje jeho vlastní tkáně.

Protilátky antistreptolysinu O jsou velmi vysoké a hladiny komplementu jsou nízké.

Reference

1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. K dispozici na adrese: wiener-lab.com.ar
2. Přispěvatelé Wikipedie. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, encyklopedie zdarma. Wikipedia, The Encyclopedia, 23. ledna 2019. Web. 19. července 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titr ve zdraví a nemoci: hladiny a význam. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. K dispozici v: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Jak používat titr antistreptolysinu O. Arch Dis Child Educ Practice Ed. 2014; 99 (6): 231-8. K dispozici v: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. (5. vydání). Argentina, Editorial Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Manuál lékařské mikrobiologie. 2. vydání, Venezuela: Ředitelství médií a publikací z University of Carabobo.