BAKTERIOLOGICKÁ SMYČKA: VLASTNOSTI, TYPY, POUŽITÍ - BIOLOGIE - 2025

Bakteriologická smyčka je pracovní nástroj používaný mikrobiologové pro setí mikrobiálních kultur (bakterií nebo hub). Je to snad nástroj, který tito odborníci nejvíce používají.

Jeho použití se zdá jednoduché, ale ve skutečnosti vyžaduje hodně školení. Před zahájením výsevu musí být smyčka sterilizována v Bunsenově hořáku, poté je odebráno mikrobiální inokulum, které může pocházet z kapalné kultury nebo z pevné kultury.

Druhy bakteriologických smyček. Zdroj: Nebyl poskytnut žádný strojově čitelný autor. お や お převzato (na základě nároků na autorská práva).

Jakmile je inokulum odebráno, může být uloženo v kapalném médiu nebo naočkováno do pevného média. Po každém postupu se smyčka znovu sterilizuje. Rukojeť je také vhodná pro výrobu mikrobiálních nátěrů na sklíčku.

Bakteriologická smyčka má mnoho jmen, včetně: platinové smyčky nebo smyčky, očkovací smyčky nebo očkovací smyčky, avšak její skutečné jméno je Kohleova smyčka.

Materiál, kterým je držadlo vyrobeno, je obvykle slitina nikl-chrom (nichrom) nebo platina. Další odrůdou na trhu jsou plastové jednorázové bakteriologické smyčky.

Na druhé straně existuje několik typů bakteriologických smyček, z nichž každá plní funkci v rámci úkolů prováděných mikrobiologem. Výběr rukojeti bude záviset na tom, co je třeba udělat.

Například pro provedení striata vyčerpáním za účelem izolace mikroorganismu se používá platinová smyčka, která končí v uzavřeném kruhu, bez ohledu na to, zda je kalibrována nebo ne.

Vzhledem k tomu, že pokud je třeba zasít vzorek moči, kde je důležité kvantifikovat CFU, je nutné použít kalibrovanou smyčku. Stejně tak pro inokulaci biochemických testů, které vyžadují zasetí propíchnutím, je nezbytná smyčka jehly. Je důležité, aby s rukojetí zacházel vyškolený personál.

vlastnosti

Bakteriologické smyčky jsou tvořeny dvěma extrémy. Jeden konec odpovídá klice nebo základně, zatímco druhý konec je klika sama.

Rukojeť základny nebo rukojeti

Základna slouží k uchopení rukojeti během manipulace. Obvykle je kovový, ale má tepelný izolátor, který zabraňuje popálení obsluhy, když je špička držadla sterilizována na zapalovači. Měří přibližně 20 cm, i když může být delší. Má závit pro nastavení rukojeti.

Rukojeť

Je to funkční konec, tj. Je to část, která přichází do styku s mikroorganismy a kultivačními médii. Skládá se z jemného drátu, který je zasunut do základny.

Rukojeť může být vyrobena z nichromu nebo platiny, proto se někdy nazývá platinová rukojeť. Je přibližně 6,5 cm dlouhý a má průchod přibližně 0,20 mm. Rukojeť s rukojetí může měřit 26,5 cm. Měření se mohou lišit podle výrobce.

Typy

Existuje několik typů bakteriologických smyček a každá z nich má specifické použití. Typy držadel jsou následující: kalibrovaná prstencová rukojeť, nekalibrovaná prstencová rukojeť, rovná nebo jehlová rukojeť, špachtlová rukojeť, rukojeť ve tvaru „L“ a rukojeť s ostrým hrotem.

Na druhé straně mohou být kliky trvalé nebo jednorázové. Ty pro trvalé použití jsou sterilizovány v zapalovači, jsou opakovaně použitelné a velmi trvanlivé. I když jsou jednorázové výrobky z výroby sterilní, používají se pouze jednou a jsou vyřazeny.

Aplikace

Rukojeť na kroužek, nekalibrovaná

Je to nejpoužívanější popisovač v mikrobiologické laboratoři. Používá se k očkování mikrobiální suspenze (kapalné médium) nebo části kolonie (pevné médium), která se naočkuje do jiného kultivačního média, a to buď biochemickým testem, nebo obohacenějším nebo selektivnějším médiem. Je také užitečná pro vytváření mikrobiálních nátěrů na sklíčku.

U tohoto typu smyčky může být počáteční inokulum pruhované. Je také navržen tak, aby hladce klouzal po agaru, aniž by jej poškodil. To samozřejmě vyžaduje, aby vyškolený personál zvládl techniku ​​setí, aby použil správnou sílu a pohyby, aby provedl dobrý tah.

S touto rukojetí lze provádět různé techniky setí. Příklad: pevná média v Petriho miskách jsou obvykle naočkována vyčerpáním (existuje několik technik, viz video 1).

Tato technika je určena k získání izolovaných kolonií za účelem jejich studia a identifikace, zejména pokud je vzorek polymikrobiální, to znamená, že kultura není čistá (obsahuje více než jeden typ mikroorganismu).

Místo toho jsou klíny zasazeny do jednoduchého klikatého k získání bakteriální hmoty, v tomto případě není nutné izolovat kolonie.

Někdy se také používají k odběru určitých vzorků. Například Rojas et al. Použil bakteriologickou smyčku ke sběru škrábaných vaginálních tkání od potkanů.

Bakteriologická smyčka s prstencovou špičkou, nekalibrovaná. Zdroj: Pixinio.com

Rukojeť ve tvaru prstence, kalibrovaná

Tento popisovač, jak naznačuje jeho název, je kalibrován tak, aby obsahoval konkrétní množství mikrobiální suspenze. Používá se, když je nezbytné, aby inokulum vyhovovalo tomu, co je v oboru standardizováno.

Například je velmi běžné pro pěstování močových kultur. V tomto případě lze použít kalibrovanou smyčku 0,01 ml a 0,001 ml.

Je třeba poznamenat, že kalibrované rukojeti mají meze chyby, která se mění v závislosti na úhlu, s nímž je vzorek odebrán, a na velikosti hrdla nádoby.

Pokud je 0,001 ml smyčka svisle vložena do nádoby s malým hrdlem (≤ 7 mm), bude odebrané množství o 50% nižší, než je požadováno.

K tomu dochází, protože čím menší je průměr ústí nádoby, tím vyšší je povrchové napětí a tím se zvyšují adhezní síly mezi (sklo - kapalina). To způsobí, že náboj kapaliny přijatý za rukojeť bude menší.

Vzhledem k tomu, že je-li odebrán v úhlu 45 ° v nádobě se širokým hrdlem (≥ 22 mm), může být shromážděno o 150% více, než je požadované množství. V tomto případě je povrchové napětí nižší a soudržné síly sklo / plast klesají, zatímco se soudržná síla kapalina-kapalina zvyšuje.

Kvůli výše uvedenému jsou pro močové kultury někdy preferovány jiné způsoby kvantifikace jednotek tvořících kolonie.

Rovná nebo jehlová rukojeť

Nazývá se také popisovač závitu. Používá se k očkování určitých biochemických testů, zejména těch, které vyžadují očkování technikou vpichu. Příkladem jsou polotuhá média, která jsou připravena ve formě bloku, jako například: SIM, MIO a O / F médium.

Kromě toho v případě MIO a SIM, které hodnotí pohyblivost, je nezbytné, aby se vpich provedl jehlovou smyčkou, protože interpretace pozitivní pohyblivosti nastane, když bakterie rostou směrem ke stranám počátečního inokula.

Test inokulovaný smyčkovou smyčkou může zkreslit výsledky (falešně pozitivní). Z tohoto důvodu je třeba u tohoto typu výsevu dbát na to, aby propíchnutí bylo jedinečné a aby při vyjmutí vyšlo stejným směrem, do kterého vstoupilo.

Dalším testem, který musí být nasazen jehlou, i když je připraven ve tvaru klínu, je Kligler. Při této zkoušce se nedoporučuje, aby kyslík pronikal hluboko do agaru, protože pro určité chemické reakce je nutné médium chudé na kyslík. Tato rukojeť se také používá k doteku konkrétní kolonie za účelem subkultivace.

Spatulate handle

Většina mikroorganismů dává měkké, snadno prolitelné kolonie. Existují však některá mikrobiální činidla, jejichž kolonie jsou tvrdé a suché, například mykobakterie obecně a některé houby. V těchto případech je užitečné použít úchytku.

Rukojeť ve tvaru "L"

Nejčastěji se používá k zazvonění plísňových kultur, zejména plísní.

Ostrá rukojeť hrotu

Je užitečné pro odebírání velmi malých kolonií přítomných v polymikrobiálních kulturách, aby bylo možné je subkultivovat.

Výsevní techniky

Video 1

Sterilizace držadla platiny

Rukojeť musí být před a po použití sterilizována. Pro sterilizaci bakteriologické smyčky v zapalovači postupujte následovně: držadlo by mělo být umístěno v horní části plamene a zaujmout polohu co možná nejvíce svisle tak, aby se sterilizovalo od špičky nahoru.

Když jemné vlákno změní barvu na jasně červenou, lze říci, že je sterilní. Pro jeho použití se ochladí a odebere se vybraný vzorek. (Viz video 2).

Sterilizace bakteriologické smyčky

Video 2

Reference

1. "Bakteriologická smyčka" Wikipedia, The Encyclopedia. 23. července 2019, 13:31 UTC. 18. srpna 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrované kovové kliky pro mikrobiology: Alternativa vnitrostátní výroby. Soc. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. K dispozici na adrese: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey a Scott Mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, RíoR, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Stanovení analgetického účinku hexanového extraktu z květů Eupatorium arsenei na modelu akutní bolesti u potkanů. mex. Věda. farma. 2015; 46 (1): 64-69. K dispozici na adrese: scielo.org