HAEMOPHILUS INFLUENZAE: CHARAKTERISTIKA, KULTURA, PATOGENEZE, LÉČBA - BIOLOGIE - 2025

Některé kmeny Haemophilus influenzae jsou zapouzdřeny a jiné nikoli. Tobolky jsou typizovatelné podle typu sacharidů, které mají v tobolce. 6 různých typů je známo písmeny a, b, c, d, e a f.

Na laboratorní úrovni je lze diferencovat pomocí antiséra aglutinačních protilátek proti odpovídajícímu polysacharidu.

Kapslované kmeny jsou patogenní. Ty typu b jsou nejvíce invazivní a často izolované ve vážných infekčních procesech. Zatímco nezapouzdřené jsou považovány za obvyklé mikrobioty a ačkoli mohou také způsobovat infekce, nejsou obvykle invazivní a nepředstavují větší nebezpečí.

Na laboratorní úrovni je obtížné je izolovat, protože pro optimální vývoj vyžadují vysoce obohacená média, jako je čokoládový agar nebo Levithal agar.

Proto tento mikroorganismus spadá do skupiny bakterií, které jsou z nutričního hlediska náročné, ačkoli někteří autoři jim raději říkají nepříjemné mikroorganismy.

Vaše reakce na katalázové a oxidázové testy je pozitivní. Jedná se o aerobní a fakultativně anaerobní mikroorganismus, který dobře roste při teplotě 35-37 ° C, při pH 7,6 a 5% CO ₂. Z biochemického hlediska je tato bakterie klasifikována do 8 biotypů, jak navrhuje Kilian.

Klasifikace je založena na výsledcích určitých testů, jako je indol, ornitin a ureáza.

Převzato ze zdroje: Pantigozo P, Aguilar E, Santivañez S, Quispe M. Haemophilus influenzae, sérotypizace a biotypizace pacientů s ARF z nemocnice EsSalud-Cusco. SITUA 2006, 15 (1,2): 31-36. K dispozici na adrese: sisbib.unmsm.

Morfologie

Mikroskopické vlastnosti

Haemophilus influenzae je velmi podobný zbytku druhu rodu Haemophilus, protože se jedná o velmi malé koky bacily a jejich velikost se pohybuje mezi 0,2-0,3 um širokými a 0,5-0,8 um dlouhými.

Haemophilus influenzae pozorované pod mikroskopem jsou však velmi pleomorfní, to znamená, že mohou mít různé formy. Lze je považovat za velmi krátké bacily (coccobacilli) nebo o něco delší protáhlé bacily, a dokonce i vláknité. S Gramovým skvrnem zbarví červeně, to znamená, že jsou Gram negativní.

Gram přímého vzorku s Haemophilus influenzae a polymorfonukleárními kokobacily. Zdroj: Microman12345

Morfologicky jsou velmi podobné rodu Pasteurella, ale ty mají bipolární zbarvení, které je odlišuje. Nejedná se o spórotvorce. Nemají také bičíky, proto jsou imobilní.

Makroskopické vlastnosti

Po 24hodinové inkubaci na čokoládovém agaru se vytvoří velmi malé kolonie konvexního tvaru o průměru 0,5 až 0,8 mm, zrnitého vzhledu, průhledné a neprůhledné.

Po 48 hodinách inkubace kolonie rostly o něco více (1 až 1,5 mm). Je třeba poznamenat, že kolonie kmenů, které mají kapsle, mají tendenci být více mukoidní a mnohem větší, měří až 3,0 mm.

Místo výskytu

Kmeny Haemophilus influenzae kolonizují nosohltanu zdravých dětí a dospělých o 50-75%. Je také možné najít tento kmen v genitálním traktu některých jedinců.

Životní cyklus

Haemophilus influenzae je exkluzivní lidská patogenní bakterie, jejíž přirozené prostředí představuje horní dýchací trakt člověka. Tam mohou bakterie růst a prosperovat, aniž by poškodily hostitele.

Rozmnožování je asexuální štěpením, při tomto typu reprodukce organismus nejprve duplikuje svůj genetický materiál a poté vytvoří dvě nové buňky z původní kmenové buňky.

Kultura

Haemophilus influenzae kultivovaný na krevním agaru. Převzato a upraveno z: Viz stránka autora.

Termín Haemophilus je složené slovo, pochází ze dvou řeckých slov, „haemo“, což znamená krev, a „philus“, které přichází do podoby.

Tato bakterie žije až do svého názvu, protože roste skvěle na zahřátém krevním agaru (čokoládový agar). Může také růst na krevním agaru, ale musí být ve společnosti kmene S. aureus. Ten, který je beta-hemolytický, rozbije erytrocyty a uvolní faktor V, který Haemophilus potřebuje.

Takto se mohou kolonie Haemophilus vyvinout v blízkosti kmene S. aureus. Tento jev je znám jako satelit a je často používán jako diagnostická strategie.

Satelitní test (růst H. influenzae kolem striata S. aureus na krevním agaru. Zdroj: CDC-PHIL

Je třeba poznamenat, že kmen Haemophilus influenzae nevyvolává hemolýzu na krevním agaru, což jej odlišuje od jiných druhů Haemophilus, jako je H. haemolyticus a H. parahaemolyticus.

Nemoci (patogeneze)

Tento mikroorganismus je přenášen vylučováním, zejména dýcháním (slinami a hlenem), které vydávají nemocní lidé nebo nositelé bakterií.

Bakterie se pohybují v sekrecích vyloučených, když pacient kýchá nebo kašle. Bakterie se šíří v prostředí a ty jsou vnímavým jedincem vdechovány.

Haemophilus influenzae je pyogenní mikroorganismus, a proto vytváří hnisavé sekrece.

Mezi hlavní patologie, které způsobuje, patří mimo jiné meningitida, septikémie, pneumonie, epiglottitida, konjunktivitida a otitida.

Septikémie

Když bakterie vstupují do krevního řečiště, nazývá se bakterémie a je klíčovým krokem k šíření mikroorganismu do dalších orgánů nebo tkání. Když se mikroorganismus v krvi množí, nazývá se septikémie, tento stav ohrožuje celkový stav pacienta.

Meningitida

Meningitida je závažné onemocnění, které způsobuje ztuhlý krk, bolesti hlavy, zvracení nebo změny v chování, v některých případech vede k úmrtí. Tato infekce je běžná u dětí.

Zápal plic

Zvětšení (1000x) sputa od nemocného s pneumonií způsobené Haemophilus influenzae. Převzato a upraveno z: Microman12345.

Představuje to závažnou komplikaci předchozí infekce dýchacích cest, jako je bronchitida nebo akutní febrilní tracheobronchitida. Představuje vysokou horečku, dušnost nebo produktivní kašel s hnisavým sputem. Může koexistovat s bakterémií. Toto zapojení je častější u starších dospělých.

Zánět spojivek

Konjunktivitida způsobuje zarudnutí spojivky, pálení, otok víček, přítomnost hnisavého výboje nebo přecitlivělost na světlo (fotofobie).

Sinusitida

Je to infekce paranasálních dutin, která způsobuje ucpání nosu a hojný výtok. Vypouštění může být kapalné nebo silné, nazelenalé nebo nažloutlé a s krví nebo bez krve. Mezi další příznaky patří: kašel, horečka, bolest v krku a oteklé víčka. Toto postižení je obecně způsobeno nekapsulovanými kmeny.

Epiglottitida

Kromě jiných příznaků má silné a náhlé bolesti v krku, horečku, tlumený hlas nebo neschopnost mluvit, slintat. K tomu dochází v důsledku obstrukčního laryngeálního edému generovaného infekcí. To může způsobit smrt udusením.

Diagnóza

Nejlepší způsob stanovení diagnózy je prostřednictvím kultury. Vzorek bude záviset na infekčním procesu.

Pokud je podezření na meningencefalitidu, musí být odebrán vzorek mozkomíšního moku bederní punkcí pro cytochemickou studii a kultivaci. V případě septikémie budou odebrány vzorky krve k provedení řady krevních kultur.

Pokud je tento proces konjunktivitida, bude odebrána sekrece emitovaná touto sliznicí. V případě pneumonie se kultivuje vzorek sputa nebo výplachu průdušek.

Vzorky jsou nasazeny na čokoládový agar a inkubovaly aerobně s 5% CO ₂ po dobu 48 hodin inkubace.

Identifikaci lze provést pomocí ručních biochemických testů nebo také pomocí automatizovaných systémů, jako je VITEK 2.

Sérotypizace se provádí prostřednictvím aglutinačního antiséra. Kmeny Haemophilus influenzae, které nereagují na žádné antisérum, jsou klasifikovány jako nezapouzdřené nebo nestypovatelné.

Levithal agar umožňuje rozlišovat mezi kapsulovanými a nekapsulovanými kmeny.

Léčba

Haemophilus influenzae lze léčit beta-laktamy, jako je ampicilin, ampicilin / sulbactam, amoxicilin / kyselina klavulanová, piperacilin / tazobaktam. U těžkých infekcí se obvykle používají cefalosporiny třetí generace, jako například: ceftriaxon, cefotaxim a cefoperazon nebo karbaperazony.

Je důležité si uvědomit, že ampicilin se již nepoužívá, protože v současné době je většina izolovaných kmenů vůči tomuto antibiotiku rezistentní v důsledku produkce beta-laktamázy.

Lze také použít makrolidy a chinolony.

Nejvhodnější však je provést antibiogram a provést ošetření podle zaznamenané citlivosti.

Prevence

Po zavedení vakcíny proti Haemophilus influenzae typu b se pokles případů meningitidy způsobených tímto mikroorganismem významně snížil.

V současné době je kapsulární antigen typu b (polyribosyl-ribitol-fosfát) H. influenzae zahrnut do pentavalentní vakcíny, která také zabraňuje záškrtu, tetanu, černému kašli a hepatitidě B.

Vakcína se podává ve 3 nebo 4 dávkách. Schéma 4 dávek je následující:

První dávka se zahajuje ve věku 2 měsíců. Potom se podávají každé dvě měsíce další dvě dávky (tj. Ve věku 4 a 6 měsíců). Nakonec se čtvrtá dávka umístí 6 nebo 9 měsíců po umístění třetí. Poslední dávka představuje zvýšení dávky.

Kontraindikace vakcíny

Vakcína je kontraindikována u:

- Pacienti, u kterých došlo k závažné anafylaktické (alergické) reakci na složky vakcíny.

Je důležité nezaměňovat vedlejší účinky s anafylaktickou reakcí. Anafylaktické reakce jsou závažné imunitní reakce, které ohrožují život pacienta. Mezitím mohou být nežádoucími účinky místní zarudnutí v místě vpichu a horečka.

- Je také kontraindikován u nemocných nebo pacientů s nízkou obranou. V těchto případech je nutné před podáním vakcíny počkat, až se obnoví normální stav.

- Nakonec se očkování nedoporučuje u dětí mladších 6 týdnů.

Reference

1. Sakurada A. Haemophilus influenzae. Rev. chil. infectol. 2013; 30 (6): 661-662. K dispozici v: scielo
2. Nodarse R, Bravo R, Pérez Z. Haemophilus Influenzae meningoencefalitida u dospělých. Rev Cub Med Mil 2000, 29 (1): 65-69. K dispozici na adrese: scielo.sld
3. Toraño G, Menéndez D, Llop A, Dickinson F, Varcárcel M, Abreu M et al. Haemophilus influenzae: Charakterizace izolátů získaných z invazivních chorob na Kubě v období 2008–2011. Vaccimonitor 2012; 21 (3): 26-31. K dispozici v: scielo.
4. Leivaa J a Del Pozo J. Pomalu rostoucí gramnegativní bacily: skupina HACEK, Capnocytophaga a Pasteurella. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2017; 35 (3): 29-43. K dispozici na adrese: Elsevier.
5. Valenza G, Ruoff C, Vogel U, Frosch M, Abele-Horn M. Mikrobiologické vyhodnocení nové identifikační karty VITEK 2 Neisseria-Haemophilus. J Clin Microbiol. 2007; 45 (11): 3493 - 3497. K dispozici na adrese: ncbi.nlm.
6. Pantigozo P, Aguilar E, Santivañez S, Quispe M. Haemophilus influenzae, sérotypizace a biotypizace pacientů s ARI v nemocnici EsSalud-Cusco. SITUA 2006, 15 (1,2): 31-36. K dispozici na adrese: sisbib.unmsm.