SELEKTIVNÍ KULTIVAČNÍ MÉDIA: NADACE, PEVNÁ A KAPALNÁ - BIOLOGIE - 2025

Tyto selektivní kultivační média jsou bujony a agarů ty, které slouží pro izolaci definovanou skupinu mikroorganismů, zatímco inhibice rozvoje ostatních. Jsou ideální pro setí polymikrobiálních vzorků, což umožňuje získat patogen z doprovodné mikrobioty.

Mezi pevnými látkami a tekutinami existuje velké množství selektivních médií. Některé jsou určeny k izolaci grampozitivních bakterií, jako jsou koaguláza pozitivní Staphylococcus, Lactobacillus, Bifidobacteria atd.

Selektivní kultivační média. Zdroj: Air1404

Jiné pro získání gramnegativních patogenů, mezi jinými druhy rodu Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas.

Stejně tak jsou zde také pro podporu růstu hub a kvasinek, jako jsou druhy Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatofyty.

Je třeba poznamenat, že některá neselektivní obohacená média se mohou stát selektivními po přidání antibiotik. Podobně mohou být některá kultivační média zároveň selektivní a diferenciální.

Na druhé straně existují selektivní kapalná kultivační média; některé mohou sloužit jako obohacovací média, podporující exacerbaci selektivní skupiny bakterií, zatímco potlačují ostatní.

Selektivní kultivační média jsou široce používána v mikrobiologických laboratořích pro analýzu různých typů vzorků; jakož i pro izolaci velkého množství mikroorganismů v klinickém, průmyslovém, environmentálním a potravinářském zájmu.

Základ

Selektivní kultivační média jsou založena na tom, že obsahují nutriční látky, které podporují růst specifické bakterie nebo houby nebo jejich určité skupiny, a zároveň musí obsahovat inhibiční látky, které neumožňují rozvoj dalších nežádoucích mikroorganismů.

Mezi nutriční látky, které mohou obsahovat, patří: pankreatický trávník kaseinu, kvasnicový extrakt, polypeptony.

Mezi inhibiční látky patří: antibiotika, žlučové soli, jasně zelená, křišťálová violeť, bazický fuchsin, eosin, methylenová modrá, deoxycholát sodný, siřičitan sodný, sorbitanmonoleát, citronan amonný, cetrimid, chlorid lithný, telurit draselný, malachitová zelená.

Někdy mohou být média selektivní i diferenciální. Podobně se stupeň selektivity liší od jednoho média k druhému.

Některé jsou vysoce selektivní, vyznačují se extrémními nepřátelskými podmínkami pro většinu mikroorganismů, kde jen malé množství druhů je schopno odolat podmínkám přítomným v životním prostředí, a proto uspokojivě rostou. Například agar TCBS a agar MRS.

Zatímco jiní jsou středně selektivní, tj. Ti, kteří inhibují specifickou skupinu mikroorganismů, jako jsou grampozitivní bakterie. Na druhé straně upřednostňují růst velké škály gramnegativních bakterií; například agar Mac Conkey.

Konečně existují kultivační média s nízkou selektivní silou, tj. Jsou to taková, která umožňují růst velké rozmanitosti bakterií mezi gram-pozitivními a gram-negativními, jakož i některými kvasinkami, zatímco inhibují pouze malou skupinu mikroorganismů. Příklad: EMB agar.

Selektivní média s pevnou kulturou

Baird-Parkerův agar

Médium určené k detekci koaguláza pozitivních stafylokoků (Staphylococcus aureus). Obsahuje jako inhibiční látky chlorid lithný a telurit draselný.

Agar BCYE nebo agar s extraktem z aktivního uhlí z kvasinek

Je to vysoce obohacené kultivační médium, zejména pro izolaci druhů Legionella a Nocardia. Toto médium se stává selektivním přidáním antimikrobiálních látek, jako je polymyxin B, vankomycin a anisomycin.

BHI agar s antibiotiky

Agar BHI je původně obohaceným médiem, ale pokud se přidají chloramfenikol a cykloheximid, je ideální pro selektivní izolaci hub klinicky zajímavých.

VELKÝ agar

Selektivní a diferenciální médium pro izolaci druhů Candida. Obsahuje citrát amonný, bizmut a siřičitan sodný, které působí jako inhibitory růstu bakterií.

Agar Bordet Gengou

Obohacené a selektivní kultivační médium, zejména pro izolaci B ordetella pertussis a Bordetella parapertussis. Obsahuje cefalexin k inhibici doprovodné flóry.

Campy agar s krví

Médium použité k izolaci rodu Campylobacter. Obsahuje cefoperazon, vankomycin a amfotericin B k inhibici růstu gramnegativních, grampozitivních bakterií a hub.

Campylobacter Butzler Agar

Speciální médium pro izolaci druhů rodu Campylobacter. Je doplněn koňskou krví, mezi jinými živinami. Obsahuje také různé inhibiční látky, jako je novobiocin, kolistin, cefazolin, bacitracin a cykloheximid.

Campylobacter Skirrow Agar

Selektivní médium pro izolaci druhů Campylobacter. Obsahuje koňskou krev a další živiny. Jako inhibiční látky obsahuje vankomycin, polymyxin B a trimethoprim.

CCF agar nebo fruktózový agar, cykloserin, cefoxitin

Jak již název napovídá, obsahuje cykloserin a cefoxitin jako inhibiční látky a používá se k izolaci Clostridium diffcile ve stolicích, mezi jinými střevními vzorky.

Cetrimidový agar

Selektivní médium určené k izolaci Pseudomonas aeruginosa, podporující výrobu pigmentů. Cetrimid (cetyltrimethylamoniumbromid) je látka, která inhibuje růst jiných bakterií než P. aeruginosa.

Čokoládový agar s isovitalexem a vankomycinem

Toto médium je původně velmi obohaceno. Přidání vankomycinu je užitečné pro selektivní izolaci kmenů Neisseria gonorrhoeae a N. meningitidis.

CIN agar nebo cefsulodinový agar, irgasan, novobiocin

Je to středně selektivní kultivační médium pro izolaci druhů Yersinia.

Agar CNA (kolistin, kyselina nalidixová)

Je to speciální selektivní médium pro izolaci grampozitivních bakterií, jako je Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus a kvasinky, ale inhibuje rozvoj gramnegativních bakterií, jako jsou Pseudomonas a druhy čeledi Enterobacteriaceae.

Czapekův agar

Médium určené k pěstování saprofytických bakterií a hub. Toto médium obsahuje anorganický dusík. Z tohoto důvodu je toto médium považováno za selektivní, protože se mohou vyvíjet pouze mikroorganismy schopné používat anorganické sloučeniny jako jediný zdroj dusíku.

EMB agar

Mírně selektivní a diferenciální médium, používané k izolaci Enterobacteriaceae. Escherichia coli je na tomto médiu detekována zejména lesklou zeleno-černou barvou svých kolonií. Stupeň selektivity, který má, je způsoben přítomností anilinových barviv (eosin a methylenová modrá).

Endo agar

Minimálně selektivní a diferenciální médium, které se používá k izolaci a diferenciaci fermentujících a nefermentujících gram-negativních bacilů patřících do čeledi Enterobacteriaceae a do jiných rodin.

Síran sodný a bazický fuchsin inhibují většinu grampozitivních bakterií. Escherichia coli na tomto médiu produkuje charakteristické tmavě červené kolonie s duhovým nazelenalým kovovým leskem.

Hektoenův agar

Selektivní a diferenciální médium pro izolaci enteropatogenních bakterií rodu Shigella a Salmonella. Jako inhibiční látka obsahuje žlučové soli, potlačující vývoj grampozitivních a některých gramnegativních bakterií.

Löwenstein-Jensenův agar

Médium speciálně určené k izolaci a vývoji bakterií rodu Mycobacterium, zejména druhů tuberkulózy.

Médium obsahuje malachitovou zeleň; Tato látka inhibuje doprovodnou grampozitivní a grampozitivní flóru, která byla schopna odolat předchozí dezinfekci vzorku. Obsahuje také glycerin, který stimuluje růst M. tuberculosis, ale inhibuje růst M. bovis a dalších mikroorganismů.

Mac Conkey agar

Je to selektivní a diferenciální médium. Používá se k izolaci laktózových necitlivých, fermentujících a nefermentujících gram-negativních tyčinek.

Jeho selektivní charakter je zajištěn přítomností žlučových solí a křišťálově fialové. Tyto látky inhibují růst grampozitivních bakterií a některých náročných grampozitivních tyčinek.

Agar slaného mannitolu

Selektivní a diferenciální agar pro izolaci Staphylococcus aureus. Toto médium má vysokou koncentraci chloridu sodného, ​​který inhibuje růst většiny bakterií.

Agar SS

Středně selektivní a diferenciální médium pro izolaci rodů Salmonella a Shigella. Médium obsahuje inhibiční látky, jako jsou žlučové soli, citrát sodný a světle zelená. Tyto látky potlačují růst gram-pozitivních bakterií, určitých gram-negativních bakterií a některých koliform.

Regan Lowe Agar

Selektivní agar pro izolaci Bordetella pertussis. Médium obsahuje jako inhibiční látky uhlí, cefalexin a amfotericin B.

Agar SABHI

Selektivní médium pro izolaci patogenních hub, jako jsou dermatofyty, Blastomyces dermatitidis a Histoplasma capsulatum. Obsahuje chloramfenikol.

Krevní agar s bacitracinem

Speciální médium pro izolaci Haemophilus influenzae. Bacitracin inhibuje doprovodnou flóru.

Agar s koňským uhlím

Selektivní médium užitečné pro získání kmenů Bordetella pertussis a B. parapertussis z klinických vzorků. Obsahuje cefalexin k inhibici doprovodné flóry.

Krevní agar kanamycin-vankomycin (KV)

Selektivní médium, speciální pro izolaci anaerobních bakterií, jako jsou Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium a Veillonella.

Bismuth siřičitanový agar

Selektivní médium pro izolaci Salmonella enterica podskupiny enterica sérotyp Typhi. Toto médium obsahuje jasně zelený sulfit bizmutu, který inhibuje růst gram-pozitivních mikroorganismů a určitých gram-negativních bakterií.

Agar TCBS (thiosíran, citrát, žlučové soli)

Vysoce selektivní médium pro izolaci druhů rodu Vibrio. Obsahuje citrát sodný, žlučovou žluč a alkalické pH, které inhibuje doprovodnou flóru.

Thayer-Martinův agar

Vysoce výživné a selektivní médium pro izolaci Neisseria meningitidis a Neisseria gonorrhoeae. Doprovodná flóra je inhibována přítomností vankomycinu, kolistinu a nystatinu.

Světle zelený agar

Selektivní médium pro izolaci kmenů rodu Salmonella. Jak už název napovídá, obsahuje jasně zelenou jako inhibující látku. Tím se zabrání růstu grampozitivních bakterií a velkého počtu gramnegativních mikroorganismů.

Vogel-Johnsonův agar

Je to selektivní a diferenciální kultivační médium připravené pro izolaci Staphylococcus aureus a inhibuje růst gramnegativních bakterií a dokonce i některých grampozitivních bakterií. Inhibičními látkami jsou telurit draselný, chlorid lithný a glycin.

Agar XLD

Je to selektivní a diferenciální médium pro izolaci enteropatogenů Salmonella a Shigella. Deoxycholát sodný dává médiu selektivní charakter.

CHROMagar (médium Candida)

Je to selektivní a diferenciální médium, které pomáhá při izolaci a identifikaci druhů Candida. Médium obsahuje chloramfenikol, který inhibuje růst bakterií.

Střední Ellinghausen McCulough Johnson a Harris (EMJH)

Selektivní médium pro kultivaci leptospir. Obsahuje polysorbát 80, který inhibuje růst většiny bakterií.

Selektivní tekuté kultivační médium

BHI bujón NaCL 6,5%

Selektivní vývar pro regeneraci Enterococcus. Vysoká koncentrace chloridu sodného inhibuje růst doprovodné mikrobioty.

EC vývar

Selektivní vývar pro regeneraci celkových a fekálních koliformních organismů. Obsahuje žlučové soli, které inhibují růst jiných mikroorganismů.

GN vývar

Selektivní vývar pro regeneraci salmonel a shigel. Obsahuje citrát sodný a deoxycholát sodný, které inhibují grampozitivní bakterie a koliformy.

Vývar Rappaport-Vassiliadis

Jedná se o selektivní obohacovací médium pro druhy Salmonella. Obsahuje malachitovou zeleň jako inhibující látku.

Selenitový vývar

Je to selektivní kultivační médium, užitečné pro obohacení vzorků, u nichž existuje podezření na přítomnost enteropatogenních bakterií rodu Salmonella.

Jak již název napovídá, obsahuje seleničitan sodný jako inhibiční látku potlačující růst grampozitivních bakterií a většiny bakterií v gastrointestinálním traktu.

Tetrathionátový vývar

Selektivní vývar pro obohacení a regeneraci kmenů rodu Salmonella.

Tetrathionát vytvořený reakcí generovanou mezi thiosíranem sodným a jodovaným roztokem přítomným v médiu inhibuje růst koliformních organismů a podporuje vývoj bakterií, které obsahují enzym tetrathionát reduktázu (Salmonella).

Obsahuje také žlučové soli a některé odrůdy zahrnují jasně zelenou; obě látky inhibují nejvíce grampozitivní a některé gramnegativní bakterie (koliformní formy).

Campy thioglykolátový vývar

Speciální vývar pro podporu rozvoje C. jejuni subsp jejuni. Obsahuje amfotericin B, cefalothin, polymyxin B, trimethropim a vankomycin.

Todd-Hewitt vývar s krví a antibiotiky

Slouží k obohacení vzorků a podporuje rozvoj Streptococcus agalactiae z vaginálních sekretů. Jako inhibiční látky obsahuje kyselinu nalidixovou a gentamicin nebo kolistin.

Reference

1. Klinická mikrobiologická kultivační média (akademický rok 2012–2013). K dispozici na adrese: asignatura.us.es
2. Laboratoře BD. Campylobacter Skirrow Agar a Campylobacter Butzler Agar. 2013. K dispozici na adrese: bd.com
3. Laboratoře IVD. Löwenstein-Jensen. 2011. K dispozici na: bio-rad.com
4. Neogen Laboratories. GN vývar (Hajna). K dispozici na adrese: foodsafety.neogen.com
5. Laboratoře BD. CHROMagar. Candida Medium 2014. Dostupné na: bd.com
6. Laboratoře BD. Vývar Rappaport Vassiliadis. 2003. K dispozici na adrese: bd.com
7. Webový portál Lifeder.com. K dispozici na adrese: Lifeder.com
8. Laboratoře BD. Leptospira Medium Base EMJH2011 K dispozici na adrese:
9. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
10. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey a Scott Mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.