FAUSTOVA TECHNIKA: ZÁKLADY A MATERIÁLY, KROKY, VÝHODY, NEVÝHODY - LÉK - 2025

Faust metoda je metoda, která umožňuje koncentraci některých parazita vajíček a / nebo larev obsažených ve výkalech o plovoucí. Používá se, když jsou přímé koproparazitologické testy negativní nebo pokud chcete získat čisté vzorky bez detritu.

Koncentrační metody pro koproparazitologické vyšetření jsou tří typů: flotací, sedimentací nebo metodami, které kombinují předchozí dva. Tyto metody zvyšují šance na pozitivní výsledky.

Analýza stolice.

Metoda Faust spočívá ve smíchání části vzorku stolice s hustší látkou než vejce nebo parazity, které mají být koncentrovány. To způsobuje, že jsou méně husté a vznášejí se na povrchu. Supernatantová tekutina se shromáždí a pod mikroskopem se pro identifikaci a kvantifikaci zobrazí.

Tato metoda se používá k vizualizaci hlístových vajec. Současně se ukázalo jako velmi citlivá metoda pro diagnostiku Giardia lamblia, bičíkovitého protozoanu, který je celosvětově rozšířený. Flotační metody se nedoporučují u velmi těžkých vajíček parazitů, jako jsou tasemnice a trematody.

Paraziti jsou jednou z nejrozšířenějších střevních infekcí na celém světě, zejména v chudých zemích se špatnými hygienickými opatřeními. Z tohoto důvodu je citlivé metody, které umožňují identifikaci a kvantifikaci těchto parazitů, velmi užitečné pro diagnostiku a léčbu.

Nadace a materiály

Tato technika je založena na existenci různých měrných hmotností vajíček, parazitů, cyst, larev a detritů, přičemž se jako flotační metoda používají roztoky síranu zinečnatého.

Důvodem této metody je smíchání vzorku s roztokem síranu zinečnatého, který má vyšší hustotu než lehčí vejce, larvy nebo parazity.

To umožňuje vysrážení těžších prvků a lehčí vznášení, které se objevují v supernatantu po odstředění vzorků.

materiály

Kontejnery pro sběr vzorků stolice (Zdroj: Bobjgalindo přes Wikimedia Commons)

- Připraví se roztok síranu zinečnatého o hustotě 1,18 nebo 1,2 g / ml, pokud byl vzorek předtím ošetřen.

- Připravte stojan s dříve označenými zkumavkami.

- Mít odstředivý stroj.

- Mejte po ruce mikroskopické sklíčka a krycí sklíčka. Všechny musí být označeny

- Ujistěte se, že je k dispozici Lugolovo řešení pro zabarvení listů.

- Nechte filtrovat gázu.

- Mějte nálevky a destilovanou vodu.

- Vyhledejte označené plastové nebo lepenkové obaly.

- Také aplikátory a sterilní držadlo 5 mm.

- Lehčí pro sterilizaci rukojeti.

Kroky

Makroskopické a mikroskopické vyšetření

Pro jakékoli vyšetření stolice začíná vyšetření tím, co se nazývá "hrubé vyšetření" vzorků.

Je popsána konzistence, barva, přítomnost krve, přítomnost hlenu a přítomnost dospělých parazitů.

Poté přistoupíme k „mikroskopickému vyšetření“ stolice, záleží to na metodě. Nejjednodušší je metoda přímého nátěru, což je nejjednodušší metoda mikroskopického pozorování parazitů.

Fotografie pozorování Gardia lamblia, střevního parazita (Zdroj: Riddlemaster via Wikimedia Commons)

Postup zahrnuje umístění malého množství vzorku přímo na sklíčko. Umístěte několik kapek fyziologického roztoku, který by měl mít podobnou velikost jako vzorek. Smíchejte solný roztok se stolicí, dokud se nevytvoří homogenní směs. Umístěte krycí sklíčko a zkontrolujte pod mikroskopem.

Originální technika Faust

Druhý postup se skládá z metody Faust float, jejíž původní verze se skládá z:

1 - Za tímto účelem vložte do vhodné nádoby asi dva gramy stolice.

2- Přidejte 30 ml flotačního roztoku síranu zinečnatého, pomocí kterého se vytvoří emulze smícháním roztoku s výkaly.

3. Kmen s kovovým sítkem do druhé nádoby a přenesení do zkumavky.

4 - Přidejte další flotační roztok, dokud se ve zkumavce nevytvoří meniskus.

5. Na meniskus položte skleněný krycí sklíčko. Nechte ji 10 až 15 minut odpočinout.

6- Odstraňte krycí sklíčko a umístěte jej na sklíčko, které bude vyšetřeno pod mikroskopem.

Faustova technika odstředěním

Původně metoda nevyužívala odstřeďování, ale nyní je zahrnuta, protože se získají lepší výsledky. Tato technika zahrnuje řadu kroků k dosažení správného postupu, jedná se o následující kroky:

1 - Výkaly se promyjí vodou, dobře se promíchají a poté se filtrují gázou složenou do čtyř. Vzorek se umístí do zkumavky.

2- Odstřeďte a odstraňte supernatant (vzorky, které jsou drženy nad vodou). Kroky 1 a 2 se opakují, dokud není supernatant „čirý“.

K filtrovanému a odstředivému vzorku se přidá síran zinečnatý.

4- Dobře se míchá.

5- Znovu odstřeďte 1 minutu při 2500 ot / min (otáčky za minutu).

6 - Supernatant se izoluje sterilní smyčkou asi 5 mm; zkumavky by se neměly protřepávat.

7- Vzorek získaný ze supernatantu je umístěn na sklíčko a kapka Lugol může být umístěna do barvy, krycí sklíčko je umístěno a pozorováno pod mikroskopem.

8- Nádoby a zkumavky jsou označeny.

Výhoda

- Prvky použité pro diagnostiku lze vidět čisté a bez „detritu“, což usnadňuje pozorování listu a zkracuje dobu potřebnou pro diagnostiku.

- V supernatantu se získají larvy, vejce a / nebo cysty.

- Je to metoda s velmi nízkými náklady.

- Tento postup je velmi jednoduchý a snadno proveditelný.

- Diagnóza je rychlá a přesná.

- Vzhledem k významu a vysokému výskytu parazitózy v chudých zemích jsou tyto levné a snadno použitelné metody ideální pro diagnostiku a monitorování těchto patologických stavů.

Nevýhody

Hustota flotačního roztoku způsobuje kontrakci larev, to znamená, že se zmenšují a ve velmi krátké době se mohou deformovat. To nutí zkoušejícího provést diagnózu okamžitě a ošetřené vzorky nemohou být uchovány pro budoucí vyšetření.

Stejně jako u všech metod mikroskopické identifikace je pro přesnou diagnostiku vyžadován vysoce zkušený vyšetřující personál.

Rychlá deformace prvků nezbytných pro diagnostiku, i když jsou zjevnou nevýhodou, může být napravena okamžitým mikroskopickým pozorováním.

Reference

1. Ananias, FL (2017). Hodnocení citlivosti Faustovy metody a spontánní sedimentace pro diagnostiku giardiázy. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
2. Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Srovnávací hodnocení modifikované flotační techniky síranu zinečnatého. Žurnál klinické mikrobiologie, 7 (6), 524-528.
3. Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Citlivost a efektivita vybraných koproskopických metod - sedimentace, kombinovaná sedimentace síranu zinečnatého a flotace a metoda McMaster. Parazitologický výzkum, 115 (7), 2581-2587.
4. Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Laboratorní diagnostika parazitů z gastrointestinálního traktu. Přehledy klinické mikrobiologie, 31 (1), e00025-17.
5. Summers, WA (1942). Modifikace odstředivé flotační metody síranu zinečnatého pro regeneraci hlístových vajíček ve formalinizovaných výkalech. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.