CO JE JEDNODUCHÉ BARVENÍ? VYNIKAJÍCÍ FUNKCE - BIOLOGIE - 2025

Jediný barvení je barvení postup rychlé a jednoduché, ve kterém je použit jediný barvivo, takže se nazývá jednoduché. Používá se hlavně ke stanovení morfologie a organizace buněk přítomných ve vzorku.

Buňky jsou přirozeně bezbarvé, takže je nutné je nějakým způsobem zviditelnit při pohledu pod mikroskopem.

Lidské lícní buňky barvené jednoduchým barvením methylenovou modří.

Je důležité si uvědomit, že barviva použitá v jednoduchém barvení musí být základní s kladným nábojem (kationickým), aby se mohla spontánně vázat na buněčnou stěnu a cytoplazmu.

Tyto buněčné struktury jsou záporně nabité. Proto je kladně nabité barvivo přitahováno k buňkám a váže se na ně spontánně. Všechny buňky přítomné ve vzorku jsou tedy rychle obarveny.

Barviva použitá v jednoduchém barvení

V mikrobiologické laboratoři lze použít několik základních skvrn. Nejpoužívanější jsou:

- Methylenová modř.

- Křišťálově fialová.

- Malachitově zelená.

- Základní fuchsin.

Všechna tato barviva fungují v bakteriích dobře, protože mají kladně nabité (kationtové) barevné ionty (chromofory).

Časy barvení pro většinu těchto skvrn jsou relativně krátké. Obvykle se pohybují od 30 sekund do 2 minut, v závislosti na afinitě barviva.

Je důležité mít na paměti, že před zbarvením vzorku jednoduchým zbarvením musí být vzorek natažen a upevněn na sklíčko (sklíčko); rozšířený a pevný vzorek se nazývá nátěr.

6 kroků k jednoduchému barvení

Krok 1

Umístěte sklíčko na stojan na barvení a aplikujte požadované skvrny. Nechte působit odpovídající čas.

Normální jednoduché zabarvení trvá několik sekund až pár minut, v závislosti na použité skvrně.

Pozorování

V tomto kroku je důležité nepřekračovat doporučenou dobu pro použité barvivo, protože na desce se mohou tvořit krystaly, čímž vznikají tzv. Artefakty, které narušují morfologii buněk.

Krok 2

Opatrně omyjte skvrnu ze sklíčka destilovanou vodou z láhve nebo také pomalu tekoucí vodou z kohoutku, dokud nebude odtok jasný. To obvykle trvá 5-10 sekund.

Pozorování

Neaplikujte proud vody přímo na nátěr, abyste zabránili, že síla stejného vzorku poškodí.

Pokud nemáte destilovanou vodu, můžete bez problémů používat vodovodní vodu, protože to neovlivní výsledek barvení.

Krok 3

Vyjměte sklíčko savými papírovými utěrkami v jednom směru a bez otírání. Ujistěte se, že spodní strana sklíčka je čistá.

Krok 4

Sledujte potřísněný potěr pod mikroskopem. Začněte nejvzdálenějšími cíli, abyste mohli přesněji lokalizovat oblast, kterou chcete pozorovat. Změňte cíl tak, aby se vzorek přibližoval a přibližoval.

Pozorování

Pro použití objektivu s vyšším zvětšením (obvykle 100x) by měl být použit ponorný olej, protože to pomáhá lepšímu pronikání světla a ostřejšímu obrazu. Není nutné používat krycí sklíčko.

Krok 5

Nakonec zlikvidujte všechny vzorky ve vhodné nádobě, která je řádně označena jako „biohazard“.

Reference

1. (2001). Mikrobiologické Použití: Laboratory Manuál General Microbiology (8. ^th ed.). Společnosti McGraw-Hill.
2. Harisha, S. (2006). Úvod do praktické biotechnologie (1. ^st.). Firewall Media.
3. Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Předběžné barvení bakterií: Jednoduché skvrny. Aktuální protokoly v mikrobiologii, (SUPPL. 15), 1-5.
4. Pommerville, J. (2013). Alcamo Základy mikrobiologické laboratoře (10 ^th). Jones & Bartlett Learning.
5. Prescott, H. (2002). Laboratorní cvičení v Microbiology (5 ^th). Společnosti McGraw-Hill.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Základy mikrobiologie (1. ^st.). Vzdělání Tata McGraw-Hill.