CARY BLAIR MEDIUM: ZDŮVODNĚNÍ, PŘÍPRAVA A POUŽITÍ - BIOLOGIE - 2025

Průměrná Cary Blair je polotuhé agar, který se používá pro přepravu a uchování biologických vzorků nesoucích střevních patogenů, mikroorganismy a anaerobní labilní. Stejně jako všechny dopravní prostředky je jeho funkcí udržovat vzorek v optimálních podmínkách, dokud není kultivován. Přítomné patogenní mikroorganismy, jakož i doprovodná mikrobiota, musí zůstat životaschopné, ale bez zvýšení jejich populace.

Cary Blair Medium je výsledkem změny složení transportního média Stuart. Tato modifikace byla provedena v roce 1964 a spočívala v nahrazení systému regulujícího pH (glycerofosfát) fosfátovaným anorganickým pufrem.

A. Kultureta s médiem Cary Blair B. Sběratel stolice s médiem Cary Blair. Zdroj: A. Video Meganhow, získejte kulturu rány 2011 youtube.com B. Uživatel: Mattes

Reformulace byla nezbytná, protože její tvůrci si uvědomili, že glycerofosfát může být po určité době metabolizován některými saprofytickými bakteriemi. Tyto mnohonásobně překrývají přítomné patogeny.

Dalšími změnami byla eliminace methylenové modři a opětovné nastavení pH na alkalitu (pH 8,4). Všechny tyto změny zlepšily účinnost dopravního prostředku.

Původně se médium Cary Blair používalo k udržování střevních patogenů, jako jsou Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae a Campylobacter sp.

Následně však byla pozorována účinnost při zachování životaschopnosti náročných a labilních patogenů, jako jsou: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae a některé anaeroby.

Základ

Médium Cary Blair obsahuje chlorid sodný, thioglykolát sodný, fosforečnan disodný, chlorid vápenatý a agar.

Chlorid sodný udržuje osmotickou rovnováhu média, fosforečnan sodný a chlorid vápenatý rovnováhu pH. Thioglykolát sodný udržuje nízký oxidačně redukční potenciál, zatímco malá část agaru poskytuje polotuhou konzistenci.

Médium Cary Blair neobsahuje výživné látky, protože funkcí transportního média je udržovat vzorek, aniž by prošlo změnami, pokud jde o vlhkost a mikrobiální zatížení; to znamená, že zabraňuje dehydrataci vzorku při zachování životaschopnosti a množství přítomných mikroorganismů.

Konečně, mírně alkalické pH zabraňuje odumírání mikroorganismů kyselostí, zejména Vibrios jsou velmi citlivé na kyseliny.

Příprava

Médium Cary Blair je komerčně dostupné jako speciální zařízení připravené k použití. Transportní systém je zakryt plastovým sáčkem Peel Pack. Uvnitř obsahuje tampón pro odběr vzorku a zkumavku s nádobou pro polotuhé médium Cary Blaira.

Na trhu jsou také komerční domy, které dodávají dehydratované médium pro jeho přípravu v laboratoři.

Za tímto účelem se naváží 13,2 g dehydratovaného média a rozpustí se v jednom litru destilované vody. Zahřívejte a protřepávejte přípravek, dokud se úplně nerozpustí. Distribuujte médium do zkumavek se šroubovacím uzávěrem (bakelit).

Zkumavky napařte 15 minut. Nechejte vychladnout a až do použití uchovávejte při pokojové teplotě.

Naočkované médium Cary Blair lze optimálně skladovat až 18 měsíců při pokojové teplotě.

PH média musí být upraveno na 8,4 ± 0,2. Barva připraveného média je béžová, s určitou opalescencí.

Použití

Typ vzorků

Médium Cary Blair se používá, když vzorky stolice, rektální výtěry a vaginální výtěry nelze okamžitě zpracovat.

Pokud není k dispozici žádný dopravní prostředek, mohou být vzorky skladovány při -70 ° C.

Vzorkování

Tampón se impregnuje vzorkem a zavede se do média Cary Blair, aniž by dosáhl dna.

Identifikace vzorku

Médium Cary Blair musí mít štítek, na kterém jsou umístěny základní údaje, jako například: jméno a příjmení pacienta, identifikační číslo vzorku, zdroj odběru vzorku, ošetřující lékař, datum a čas odběru. vzorek, presumptivní diagnostika, léčba antibiotiky.

Převod

V případě fekálních vzorků je pevně zakryt a přepravován při pokojové teplotě. Zatímco u vaginálních vzorků při vyhledávání anaerobních mikroorganismů se doporučuje vzorky přepravovat při 4 ° C.

Ve všech případech je doporučená doba přenosu 4-6 hodin, maximálně 24 hodin.

Pokud je podezření na přítomnost Campylobacter jejuni ve vzorcích stolice a nelze je zpracovat do 24 hodin, doporučuje se skladování v médiu Cary Blair při 4 ° C.

Výzkum prováděný na dopravních prostředcích Cary Blair

Několik studií ukázalo, že médium Cary Blair může zůstat životaschopné pro enteropatogenní mikroorganismy rodu Shigella a Salmonella až 49 dní po odběru vzorku.

Vibrio cholerae, další důležitý střevní patogen, je schopen přežít po dobu 22 dnů, zatímco Yersinia pestis (původce bubonického a pneumonického moru) lze obnovit po 75 dnech.

Navzdory prokázané trvanlivosti, pokud jde o regeneraci těchto mikroorganismů, se však doporučuje, aby odebrané vzorky byly transportovány v médiu Cary Blair do laboratoře co nejrychleji.

Stejně tak, jakmile vzorek dosáhne laboratoře, musí být neprodleně naočkován do příslušného kultivačního média.

Na druhé straně se médium Cary Blair kromě toho, že je užitečné pro transport fakultativních mikroorganismů, doporučuje také pro vzorky obsahující anaerobní patogeny.

V tomto smyslu provedla DeMarco a kol. V roce 2017 studii nazvanou: Přežití vaginálních mikroorganismů ve třech komerčně dostupných transportních systémech.

Ukázali, že transportní médium Cary Blair je nejlepším transportním médiem pro uchování a zotavení vaginálních anaerobních mikroorganismů. Rovněž prokázali, že nejvyššího výtěžku bylo dosaženo, když byla teplota přenosu 4 ° C.

Proto se vyvozuje závěr, že transportní teplota vaginálních výtěrů (anaerobních mikroorganismů) by měla být 4 ° C. Zatímco pro fekální vzorky při hledání fakultativních mikroorganismů je ideální teplota pokojová teplota.

QA

Pro vyhodnocení kontroly kvality transportního média Cary Blair, kmenů známých jako Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae a Campylobacter sp.

Médium se naočkuje zvoleným kmenem a udržuje se při teplotě místnosti po dobu 24 hodin. Poté jsou zasety do odpovídajících kultivačních médií. Ve všech případech se očekává uspokojivé zotavení dotyčného mikroorganismu.

Reference

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, a kol. Přežití vaginálních mikroorganismů ve třech komerčně dostupných transportních systémech. Anaerobe. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Porovnání konzervačních médií pro skladování vzorků stolice. J Clin Microbiol. devatenáct devadesát pět; 33 (8): 2176-2178.
3. Dan M, Richardson J., MD Miliotis, Koornhof HJ. Porovnání konzervačních médií a zmrazovacích podmínek pro skladování vzorků fekálií. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologická diagnostika. 5. ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey a Scott Mikrobiologická diagnostika. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
6. Conda Pronadisa Laboratories. Half Cary Blair. K dispozici na adrese: condalab.com
7. Metrix Laboratory. Cary Blair. K dispozici na adrese: metrixlab.mx